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DNA氣溶膠污染去除劑

簡要描述:

DNA氣溶膠污染去除劑公司正在出售的產(chǎn)品:倉鼠肺細(xì)胞 軸突導(dǎo)向因子SEMA6D封閉多肽 羊痘病毒PCR檢測試劑盒 大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA檢測試劑盒 硫氧還蛋白氧化還原(TrxR)活性比色法檢測試劑盒 居藻芽孢桿菌 脂多糖相關(guān)反應(yīng)蛋白5/γ-taxilin抗體

更新時間:2024-01-12

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DNA氣溶膠污染去除劑

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

A-PJ1064

DNA氣溶膠污染去除劑

100ml

描述:氣溶膠是懸浮于氣體介質(zhì)中粒徑一般為 1 nm ~ 1 mm 的固體、液體微小粒子形成的膠溶狀態(tài)散體系,其分 散并懸浮在氣體介質(zhì)中的核酸聚合物,廣泛存在于實(shí)驗(yàn)室 桌面、儀器、耗材以及空氣中。 DNA 氣溶膠與核酸擴(kuò)增過程(PCR、LAMP 等)相 伴相生??諝馀c液體面摩擦、離心機(jī)離心、劇烈地?fù)u動反 應(yīng)管、PCR 開蓋、移液器的反復(fù)吸樣、污染物的外泄等 途徑,都會產(chǎn)生 DNA 氣溶膠。分子實(shí)驗(yàn)室作為科研和臨 床檢驗(yàn)場所,PCR(或 LAMP)的使用頻率較高,且樣本 和擴(kuò)增目標(biāo)經(jīng)常出現(xiàn)多批次相同的情況,DNA 氣溶膠污 染在實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)不斷累積,污染風(fēng)險(xiǎn)不斷增加,假陽性的 發(fā)生頻率也越來越高。PCR 等技術(shù)的高擴(kuò)增效率,產(chǎn)生 的核酸氣溶膠污染,會導(dǎo)致檢測結(jié)果的假陽性。假陽性意 味著實(shí)驗(yàn)不可信,并且直接造成實(shí)驗(yàn)室經(jīng)濟(jì)損失。更嚴(yán)重 的是,如果形成氣溶膠污染,則可引起整個 PCR 實(shí)驗(yàn)室 的污染,甚至要關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室。 由于 DNA 高耐熱性、高吸附能力、對有機(jī)溶劑的高 耐受性特點(diǎn),無論采用高壓滅菌、清水沖洗、酒精擦洗均 不能去除 DNA 污染。 全新開發(fā)的強(qiáng)力核酸 酶(DNA Cleaning 酶),可在室溫 15min 內(nèi)將 DNA 污染物降解為 2-6 bp 的寡核苷酸,無論是移液器、PCR 儀、耗材、實(shí)驗(yàn)室桌面上的 DNA 吸附污染物均被酶解。 DNA 被酶解后,DNA Cleaning 酶可在 60℃烘干 10min 或者 70%酒精擦拭后不可逆失活,從而避免后續(xù)對實(shí)驗(yàn) 的影響。該制品不含任何有機(jī)毒性溶劑,無毒、無腐蝕性, 不對設(shè)備造成任何損傷。

 儲存: -20℃可保存 3 年。 

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PCR 反應(yīng)需要使用哪些試劑和設(shè)備?

試劑:
模板DNA:PCR反應(yīng)需要模板DNA,如從細(xì)胞、組織、血液中提取DNA等;引物:PCR反應(yīng)的兩個引物,分別與模板DNA的兩端配對擴(kuò)增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;dNTPs:PCR反應(yīng)中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細(xì)胞分裂、DNA合成等生物學(xué)過程,用于PCR擴(kuò)增的模板DNA鏈的延伸和擴(kuò)增;Taq DNA聚合酶:PCR反應(yīng)需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴(kuò)增DNA鏈;PCR buffer溶液:對PCR反應(yīng)具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應(yīng)pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機(jī)化合物如甲醛,可增強(qiáng)PCR反應(yīng)特異性,從而提高反應(yīng)效率;酶切體系:PCR擴(kuò)增往往涉及到重組、構(gòu)建和測序等等實(shí)驗(yàn)步驟,常常需要進(jìn)行酶切操作。MARK:一種分子量標(biāo)準(zhǔn),用來判別DNA片段大小的工具。DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物;
設(shè)備:
PCR儀:用于控制反應(yīng)溫度,保證PCR反應(yīng)時不同溫度環(huán)節(jié)的嚴(yán)格控制;電泳槽:用于分離PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;核酸提取儀:從組織樣本中全自動提取核酸。  這些試劑和設(shè)備在PCR分子生物學(xué)技術(shù)中均是,只有在有序齊全的基礎(chǔ)上,才能進(jìn)行PCR反應(yīng)并得出準(zhǔn)確結(jié)果。

PCR相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn):

PCR反應(yīng)基本步驟一般的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)由20到35個循環(huán)組成,每個循環(huán)包括以下3個步驟:

一、變性:

利用高溫(93-98℃)使雙鏈DNA分離。高溫將連接兩條DNA鏈的氫鍵打斷。在第一個循環(huán)之前,通常加熱長一些時間以確保模板和引物分離,僅以單鏈形式存在。該步驟時間1-2分鐘,接下來PCR儀就控制溫度進(jìn)入循環(huán)階段。

二、退火或稱接合,復(fù)性:

在DNA雙鏈分離后,降低溫度使得引物可以結(jié)合于單鏈DNA上。此階段的溫度通常低于引物熔點(diǎn)5℃。錯誤的退火溫度可能導(dǎo)致引物不與模板結(jié)合或者錯誤地結(jié)合。該步驟時間1-2分鐘。

三、延伸:

DNA聚合酶由降溫時結(jié)合上的引物開始沿著DNA鏈合成互補(bǔ)鏈。此階段的溫度依賴于DNA聚合酶。該步驟時間依賴于聚合酶以及需要合成的DNA片段長度。傳統(tǒng)的Taq估計(jì)合成1000bp/min、較新的Tbr(來自于嗜熱菌Thermus brockianus)約40秒、商業(yè)公司生產(chǎn)的融合型聚合酶僅需約10-15秒。

PCR反應(yīng)條件優(yōu)化:

1、變性溫度和時間:

保證模板DNA解鏈?zhǔn)潜WC整個PCR擴(kuò)增成功的關(guān)鍵。加熱90~95°C, 30~60s,再復(fù)雜的DNA 分子也可變性為單鏈。溫度過高或高溫持續(xù)時間過長,可對Taq酶活性和dNTP分子造成損害。

2、復(fù)性溫度和時間:

PCR擴(kuò)增特異性取決于復(fù)性過程中引物與模板的結(jié)合。復(fù)性溫度越高,產(chǎn)物特異性越高。復(fù)性溫度越低,產(chǎn)物特異性越低。需根據(jù)引物的Tm值具體設(shè)定。

3、延伸溫度和時間:

一般位于Taq酶最適作用溫度70~75°C之間。引物小于16個核苷酸時,過高的延伸溫度不利于引物與模板的結(jié)合,可以緩慢升溫到70~75°C。延伸反應(yīng)時間,可根據(jù)待擴(kuò)增片段的長度而定,小于1kb, 1min足夠;大于1kb需加長延伸時間。Taq酶可根據(jù)1kb/min增加時間。這里需要注意,延伸時間過長可能出現(xiàn)非特異擴(kuò)增。因此需要設(shè)置恰到好處的延伸時間。

4、循環(huán)數(shù):

其他參數(shù)選定后,PCR循環(huán)次數(shù)主要取決于模板DNA的濃度。理論上說20?25次循環(huán)后,PCR產(chǎn)物的積累即可達(dá)到最大值,實(shí)際操作中由于每步反應(yīng)的產(chǎn)率不可能達(dá)到100%,因此不管模板濃度是多少,20~30次是比較合理的循環(huán)次數(shù)。循環(huán)次數(shù)越多,非特異擴(kuò)增增加。

公司正在出售的產(chǎn)品:

桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒

半胱氨酰白三烯ELISA試劑盒 CysLTs免費(fèi)代測試劑

腸道病毒D68型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

匙形古柏線蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格

單酰甘油-O-酰基轉(zhuǎn)移1ELISA試劑盒 MOGAT1免費(fèi)代測試劑

鳥分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書

羊衣原體

細(xì)胞周期KELISA試劑盒

馬乳頭瘤病毒PCR檢測試劑盒

胡桃PCR檢測試劑盒

蛋白ATP1B4ELISA試劑盒

馬蘇哈魚病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

馬乳頭瘤病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

抵抗樣蛋白βELISA試劑盒

梭狀桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒

蕎麥源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

動力蛋白激活蛋白2ELISA試劑盒

牛傳染性鼻氣管炎病毒(IBRV)核檢測試劑盒

侵入性絲囊霉菌PCR檢測試劑盒

多巴脫羧ELISA試劑盒

羌活探針法PCR鑒定試劑盒

馬皰疹病毒型PCR檢測試劑盒

多型性腺瘤基因樣蛋白1ELISA試劑盒

鏈霉菌通用PCR檢測試劑盒

馬腦脊髓炎病毒(VEEVPCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)

二肽基肽6ELISA試劑盒

牛腺病毒(4-8型)通用探針法熒光定量PCR試劑盒

前病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

防御β115ELISA試劑盒

馬皰疹病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒

鐮刀菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒

人丁型肝炎IgM(HDV IgM)檢測試劑盒elisa

氣管比翼線蟲PCR檢測試劑盒

牛型放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒

人基質(zhì)裂解(ST3)試劑盒ELISA

藍(lán)氏賈第鞭毛蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

阪崎腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

DNA氣溶膠污染去除劑人層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)ELISA試劑盒

隱襲腐霉探針法熒光定量PCR試劑盒

摩氏摩根菌探針法熒光定量PCR試劑盒

β2糖蛋白(β2-GP)ELISA Kit

網(wǎng)尾線蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒

草魚出血熱病毒(GCHV)核檢測試劑盒

人成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF-23)ELISA檢測試劑盒

茄病鐮刀菌PCR檢測試劑盒

 


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