大鼠ELISA試劑盒操作的任一步驟出錯(cuò)都會影響測試結(jié)果
點(diǎn)擊次數(shù)：752 更新時(shí)間：2019-02-28
對于任何一種ELISA試劑盒來說，保存工作都是使用者需要注意的，這樣才不會影響到試劑盒的運(yùn)用，大鼠ELISA試劑盒也不例外，那么對于大鼠ELISA試劑盒來說，應(yīng)如何做好保存工作呢，接下來就隨著小編一起來看看吧。
1、大鼠ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2、濃洗刷液可能會有結(jié)晶分出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗刷時(shí)不影響成果。
3、各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器，并常常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。
4、請每次測定的一起做規(guī)范曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于規(guī)范品孔*孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(shù)(n倍)后再測定，核算時(shí)請乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
我們知道，
大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測定模式，試劑盒操作簡單，涉及到標(biāo)本的收集保存、試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報(bào)告及解釋等方面，其中任一步驟的不當(dāng)都會影響測定結(jié)果，且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。大鼠elisa試劑盒正確的加樣方法應(yīng)為45度，吸頭貼著孔壁加入，應(yīng)注意角度太小，會使液體殘留在孔壁上，導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確；吸頭應(yīng)當(dāng)貼著管壁和液面的交界處。
此外，凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價(jià)跌落，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。
后一點(diǎn)，血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測標(biāo)本。在大鼠elisa試劑盒中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的大鼠elisa試劑盒測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。
